HPLC漏氣

                                                          上海連橋生物科技有限公司

漏氣

漏液是從內(nèi)部向外漏，而漏氣則是外部的氣體進(jìn)入液相色譜儀的流路內(nèi)部形成了氣泡。下面按流路的方向逐個部件分析產(chǎn)生氣泡的原因和相應(yīng)解決方法。

1.過濾頭

抽液時，在流路管中有不規(guī)則但持續(xù)的小氣泡產(chǎn)生，這時考慮的是流動相有沒有脫氣（需要特別提醒即使是有了真空脫氣機也是要先超聲脫氣的，起碼可以減少脫氣機的工作壓力并提高工作效率），如果已經(jīng)脫了氣，則要注意過濾頭的污染也會造成這種現(xiàn)象。處理方法比較簡單，擰下過濾頭在稀硝酸中浸泡，超聲半小時，洗凈后裝回去即可。

2.透明流路管

指的是在過濾頭和輸送泵之間的那一段管路。這一個部分往往不是有點氣泡，而經(jīng)常是整個管中全是空氣而操作人員卻渾然不知，以致輸送泵工作了半天才發(fā)現(xiàn)流動相瓶里的液體一點也沒少。這也是我們常說的液相色譜儀至少一周要開機一次的原因（我們做液相一定要有“微滲"的概念）。如果長時間不用，這一段管路的液體會*干掉，而充滿空氣的管路和充滿液體的管路不仔細(xì)看是分辨不出的。

這種情況對于輸送泵很危險，因為，泵從設(shè)計來說是輸送液體而不是氣體，內(nèi)部的液體對于活塞來說起到了機油的作用，如果活塞桿上還殘存了一些緩沖鹽，則極易拉傷，造成不可逆轉(zhuǎn)的影響。

對于這種情況，要突出“預(yù)防為主"，如，液相色譜使用人員要相對固定和穩(wěn)定，工作中合理搭配資源，每臺機一周至少作一次實驗，如長期不用起碼每周要沖流動相2 小時。養(yǎng)成良好的工作習(xí)慣很重要。如果不慎出現(xiàn)了這種問題怎么辦？我的建議是用外力使管路中充滿液體。具體如下：

(1)找到流路管進(jìn)入輸送泵的接頭。

(2)擰下來。

(3)用一干凈的洗耳球的尖duan對準(zhǔn)管路的平整切口。

(4)吸液體，看液面從流動相瓶里上升，至離洗耳球5 厘米左右時停止該動作。

(5)快速把接頭擰回輸送泵上（這個過程可能會有少許流動相外泄，這是正常現(xiàn)象）。

(6)開機，打開排液閥門，啟動輸送泵。

(7)等排液管中流出的溶液沒有氣泡時，再關(guān)閉排液閥，儀器正常工作。

3.輸送泵和柱子

這些部分進(jìn)了氣泡一般不怕，沖掉就行。

4.檢測器

應(yīng)該說，整個流路中只要有一個氣泡都會在檢測器上得到強烈的信號反映，檢測器內(nèi)部的氣泡一般都能被沖走，但也有很難沖掉的殘留氣泡的情況。

如果檢測器里有殘留氣泡，會有特征明顯的表現(xiàn)形式，就是在走基線時會時不時間隔出現(xiàn)直上直下信號很大的信號峰。這時先看普通流量能否沖走，如果沖不走，那wei一的辦法就是拆柱，把檢測器直接連到輸送泵的出口，加大幾倍流量沖洗，則肯定能沖走氣泡。

                                                                                                                                                 本篇轉(zhuǎn)載至實驗之家